Os efeitos fisiológicos e psicológicos da Compaixão e da raiva
Rein Glen, Mike Atkinson e McCraty Rollin

Jornal de Avanços na Medicina. 1995, 8 (2): 87-105. Reproduzido com permissão.

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Resumo
Referências
Resumo
IgA salivar, freqüência cardíaca e de humor foram mensurados em trinta indivíduos antes e depois de experimentar o cuidado ou a raiva. Dois métodos de induzir a estados emocionais foram comparados: auto-indução e indução externa através de fitas de vídeo. Raiva produziu um aumento significativo no total de perturbação do humor e da freqüência cardíaca, mas não em níveis de S-IgA. As emoções positivas, por outro lado, produziu um aumento significativo nos níveis de S-IgA. Examinando os efeitos ao longo de um período de seis horas observou-se que a raiva, em contraste com cuidado, produziu uma inibição significativa da IgA-S de um a cinco horas após a experiência emocional. Os resultados indicam que a auto-indução de estados emocionais positivos é mais eficaz em estimular o S-IgA do que os métodos anteriormente usados externo. técnicas de auto-indução pode ser útil para minimizar os efeitos imunossupressores das emoções negativas.



Introdução
salivar de imunoglobulina A (IgA-S) é a classe de anticorpo predominante nas secreções mucosas [1], fornece a primeira linha de defesa contra patógenos no trato respiratório superior, o sistema gastrointestinal e do trato urinário [2], e é freqüentemente usado como uma medida da imunidade secretora. Níveis mais altos de S-IgA são associados com diminuição da incidência de doenças e suscetibilidade a infecções respiratórias superiores [3, 4].

Embora seja sabido que fatores psicossociais, incluindo os principais eventos estressantes da vida, produzir efeitos negativos em uma variedade de funções imunes [5], a maioria dos estudos não distinguem os estados afetivos específicos de uma resposta ao estresse generalizado. estressores Menor associados negativos eventos da vida cotidiana afetam o humor [6, 7] e, surpreendentemente, oscilações de humor menores são mais fortemente correlacionada com a doença do que os estressores importantes [8]. Emoções e humores têm sido estudados em relação aos seus efeitos sobre o sistema imunológico [5] e sobre a freqüência, gravidade e suscetibilidade a doenças [9, 10].

Redução dos níveis de S-IgA são vistos na sequência de uma variedade de fatores psicossociais, incluindo as situações estressantes da vida, a retirada do apoio social [11] e estados emocionais negativos como a perda [12], a ansiedade [13] e a necessidade de ter poder e influenciar os outros [3, 14]. efeitos imunossupressivos das emoções negativas também têm sido relatadas em termos de diminuição da proliferação de linfócitos [15] e uma inibição da atividade de células natural killer [16].

Em contrapartida, relativamente poucos têm investigado o efeito das emoções positivas sobre o sistema imunológico. Stone [17] estudaram normal estados afetivos medindo flutuações diárias do humor e observaram uma correlação entre os dias quando os indivíduos experimentaram estados de ânimo positivos e elevados níveis de S-IgA. Estudos anteriores sobre as emoções positivas de felicidade e alegria relataram resultados conflitantes, com alguns investigadores observando immunoenhancement [18-20], enquanto outros observaram imunodepressão [15] ou nenhuma alteração na imunidade [15, 21].

Outra abordagem para estudar os estados emocionais positivos é o uso de pessoas com amor e carinho características psicológicas. Essas qualidades, conhecido como motivação a afiliação, são definidos como um desejo de estabelecer e manter relações calorosas com os outros. Indivíduos que recebem apoio social adequado apresentam maior tendência de filiação [22], tem menos estresse da vida [22], apresentaram aumentos menores nos hormônios do estresse após estresse [23] e são menos propensos a adoecer [3, 24]. Essas pessoas também tendem a apresentar aumento da atividade das células matadoras naturais [16] e aumentou a S-IgA, mesmo quando forçado [11, 25]. McClelland e Kirshnit [26] relatou que as qualidades de filiação pode ser induzida em participantes, tendo-lhes assistir a um vídeo do trabalho da Madre Teresa com a morte na Índia depois que um aumento imediato nos níveis de S-IgA foi observada.

O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos imediatos das emoções positivas e negativas em S-IgA e para examinar os efeitos durante um período de seis horas. Nós também estávamos interessados em comparar o método mais tradicional de emoções externamente induzir, fazendo com que os temas selecionados assistir vídeos, com uma técnica de manejo do estresse recém-desenvolvido que treina temas de auto-indução e experiência genuína, de coração sentiu emoções em si. Estudamos também o curso de curto prazo dos níveis de S-IgA após uma experiência emocional para testar a hipótese de que mudanças máximo em S-IgA ocorrem durante ou imediatamente depois de experimentar emoções.



Métodos
Sujeitos
Um total de trinta indivíduos, 13 machos e 17 fêmeas, foram divididos em vários subgrupos utilizados neste estudo. Todos os pacientes eram saudáveis e estavam livres de sintomas respiratórios, resfriados e dores de cabeça. A idade dos indivíduos variou entre 17 e 50 (média = 38). Todos os indivíduos mantiveram o mesmo horário de trabalho, o ciclo de sono, o ambiente social e dieta. Nenhum dos indivíduos estava a tomar medicamentos prescritos e por pelo menos 8 horas antes de cada período de testes, voluntários se abstiveram de fumar, fazer exercícios, comer ou beber qualquer coisa, exceto água. Todos os indivíduos foram treinados em uma técnica de gerenciamento do estresse chamado Freeze-Frame que tem sido descrito em detalhe em outro lugar [27].



Design Experimental
Todos os experimentos foram iniciados às 10 horas para minimizar as variações diurnas. Um estudo preliminar foi projetada para testar os diferentes efeitos de auto-induzida (Freeze-Frame) e externamente induzida (fitas de vídeo) emoções no S-IgA. Vinte participantes foram divididos aleatoriamente em quatro grupos com cinco indivíduos em cada grupo. Dois desses grupos foram convidados a experiência de cuidado e / ou compaixão (C & C), ea raiva dos outros dois e / ou frustração (A & F). Os dois grupos foram avaliados em duas ocasiões distintas, com dois dias entre cada experimento. Auto-induzidos e métodos de indução externa foram utilizados tanto para o &C; C e os grupos &F;. O método de auto-indução foi mais efetiva na indução de estados emocionais e estimular os níveis de S-IgA e, portanto, utilizados no estudo principal objectivo determinar os efeitos a longo prazo de uma &C; &F; e C sobre os níveis de S-IgA. Nos sujeitos do estudo principal foram: idade e sexo e foram divididos aleatoriamente em três grupos de dez indivíduos cada. Um grupo experiente A & F, o segundo grupo C &C; eo terceiro grupo funcionou como controle. Todos os indivíduos de cada grupo foram testados em um único dia e todos os três grupos foram testadas dentro de um período de sete dias.

No estudo preliminar unstimulated amostras de saliva foram coletadas em uma proveta graduada, para um período de coleta de 4 minutos de acordo com o procedimento de Kerr [28]. Amostras de saliva foram coletadas na chegada ao laboratório e após um período de descanso de 15 minutos. A diferença entre essas duas amostras foi usado como um controle efeito de relaxamento. Os indivíduos foram dadas instruções para se sentar calmamente e não intencionalmente alterar seu estado emocional durante o período de descanso. Os indivíduos foram convidados a experimentar um estado emocional específico por um período de 15 minutos. No final deste período um adicional de 4 minutos amostra de saliva foram coletadas e os pacientes completaram um questionário de auto-relato desenvolvido para avaliar a nível de excitação emocional. Amostras de saliva foram congelados dentro de uma hora de coleta e armazenado em nitrogênio líquido.

Para o estudo principal, os participantes foram convidados a experimentar o estado emocional por um período de 5 minutos. Na chegada, cada participante foi ligado para monitorização de ECG. Amostras de saliva não estimulada foram coletadas imediatamente antes e após a estímulos emocionais. Além disso, as amostras foram coletadas com diferentes tempos de coleta do fluxo salivar, a fim de determinar se a coleta de vezes mais mascara a resposta IgA-S durante a expressão emocional. Uma amostra de 0,25 ml (correspondente a 15 segundos), uma amostra de um minuto e uma amostra de três minutos foram coletadas para valores basais. Imediatamente após a experiência emocional, uma amostra de 0,25 ml adicionais e quatro amostras seqüenciais de um minuto, também foram coletados. A primeira amostra de um minuto dessa seqüência foi comparada com a amostra de referência de um minuto. As quatro amostras seqüenciais de um minuto, onde, em seguida, em média, e comparado com o valor médio obtido pela soma de todas as amostras de referência de um minuto.

Além dessas amostras, 0,25 ml foram coletadas amostras em intervalos horários durante um período de seis horas de partida uma hora depois da experiência emocional. Um volume fixo de 0,25 ml foi escolhido como o volume médio coletado em um período de tempo de 15 segundo, porque era mais conveniente ter assuntos preencher a saliva a um nível marcado em um tubo de ensaio.

Os indivíduos na condição de controle não foram dadas instruções relativas ao seu estado emocional. amostras de saliva não estimulada de 0,25 ml foram coletadas antes e depois de ouvir uma selecção equilibrada de música emocionalmente neutro por 5 minutos.



Induzir estados emocionais
&C; C e A &F; foram escolhidos como sendo representativos positivo e estados emocionais negativos. Para ambos os casos, os participantes foram convidados a experimentar as emoções de um sentimento tão profundo nível possível. Sentimentos de carinho e compaixão foram induzidos por dois métodos diferentes: intencionalmente auto-indução dos sentimentos e externamente, estimulando-as com as fitas de vídeo. A fim de facilitar o método de auto-indução de uma técnica chamada Freeze-Frame foi usado. Esta técnica permite que os participantes conscientemente desengatar a partir de reações mentais e emocionais a eventos externos ou internos, deslocando a atenção para a área física em torno do coração, onde a maioria das pessoas sente subjetivamente emoções positivas, e centrando-se em sentimentos de cuidado ou compaixão [alguém ou alguma coisa 27, 29, 30]. No método externo de induzir emoções positivas, os participantes foram convidados a experimentar livremente todas as emoções sentidas ao assistir uma fita de vídeo de Madre Teresa, uma freira católica romana cuidar de doentes e morrendo nas favelas de Calcutá.

Estados emocionais negativos foram induzidos por auto-recordação e métodos de estimulação de vídeo. emoções auto-induzidos foram realizados, solicitando temas para recordar a situação em suas próprias vidas que despertam sentimentos de raiva e / ou frustração. Os assuntos foram pedidos para recuperar e manter os sentimentos da melhor forma possível. No segundo método participantes foram instruídos para experimentar todas as emoções despertadas enquanto assiste a um vídeo especialmente editado por cenas de guerra semelhante ao utilizado por McClelland [26].



Teste Psicológico
No estudo preliminar, um questionário auto-aplicável foi utilizado para a avaliação do humor, que consistia de sete perguntas destinadas a determinar a intensidade ea duração dos estados emocionais. A intensidade foi quantificada em uma escala de 10 pontos a partir de 1 = "muito fraca" a 10 = "muito forte", ea duração foi quantificada como uma porcentagem do período total do experimento foi a emoção sentida. escores de humor média foi calculada multiplicando a intensidade dos sentimentos, a duração da emoção. Maior pontuação média de humor reflectem uma experiência emocional mais profundo. Um segundo questionário pediu uma descrição qualitativa de outras emoções experientes e pela presença de sintomas físicos. Ambos os questionários foram dadas logo após o período experimental. O questionário qualitativo também foi concluído no estudo de longo prazo em intervalos horários durante o dia.

Além desses questionários, alterações de humor foram avaliados em estudos de longo prazo com o perfil do estado de humor (POMS) teste (Edições / Educacional e Industrial Testing Service, em San Diego, CA), que é projetado para medir transientes estados afetivos. testes de POMS foram tomadas imediatamente antes e depois de experimentar os estados emocionais. Todos os participantes avaliaram o grau em que uma série de adjetivos (65 no total) descreveram seu estado de humor presente. Cada adjetivo foi avaliada em uma escala de intensidade de 5 pontos de "nada" ou "extremamente". A perturbação do humor total (DTM) pontuação foi calculada como a soma dos escores para cada um dos seis modos primários. De acordo com o manual do POMS, todos os modos, com exceção do vigor, foram atribuídos uma pontuação negativa. escores mais elevados indicam maior perturbação do humor.



Heart Rate-Determinação
eletrodos de Ag / AgCl descartáveis eram usadas para todas as medições de ECG bipolar. O eletrodo positivo foi localizado no lado esquerdo na costela 6 e os de referência foi colocado perto da parte superior do tórax, logo abaixo da gola. Grass modelo 7P4 amplificadores foram utilizados para a amplificação de ECG. Todos os dados foram processados por um canal de 16, 16 digitador bit em conjunto com o software do sistema Pac Bio [31]. medições de ECG foram registrados para um período de estabelecimento da linha de base 15 minutos, durante o período de teste e por 15 minutos após a experiência emocional em todos os experimentos.



Deliberações S-IgA
Amostras de saliva foram analisadas para a concentração de IgA pelo método de imunodifusão radial simples de Mancini et al. [32] e disponíveis comercialmente por Binding Site Inc. Embora haja algum debate sobre a exactidão dos vários métodos disponíveis para medir o S-IgA, optamos pelo método de imunodifusão radial para permitir a comparação direta com os estudos anteriores, examinando os efeitos dos estados emocionais . Alíquotas de saliva (5ul) foram diluídos 1:02 (v / v) em tampão fosfato e colocadas nas cavidades cilíndricas de gel de agarose placas impregnadas com monoespecífico de carneiro anti-humanos S-IgA (Binding Site, San Diego, CA). Cada placa continha também um padrão de referência de 100 mg / L de soro humano purificado S-IgA (Binding Site, San Diego, CA). Após incubação de 72 horas a 20 ° C, a reação de precipitação foi completa eo diâmetro do anel foi medido utilizando um micrômetro ocular 8X com uma precisão de 0,1 mm. Todas as medições das placas foram a média das duas leituras separadas por dois leitores que variou entre 0 e 10%. Os valores de concentração de S-IgA foram lidos a partir de uma curva padrão obtida com produtos purificados de soro humano IgA-S. As variações entre as placas de ágar foram determinadas através da normalização de todos os valores para o padrão de referência. Todos os valores de S-IgA foram multiplicados por 3,25 de acordo com Brandtzæg [33] para corrigir o valor do coeficiente de sedimentação de S-IgA. concentração de S-IgA é expressa em mg / dL.



Análise Estatística
Os dados brutos do estudo preliminar foram analisadas para significância estatística usando o sinal de Wilcoxon-teste classificou repetidas medidas. Uma análise unicaudal foi usado para comparar as emoções positivas já que estudos anteriores aumentos previstos somente em S-IgA. análises bicaudal foram utilizados com todos os demais análises estatísticas. Os dados brutos do estudo principal foram analisados para o significado global usando um 2 x 2 análise de medidas repetidas de variância (ANOVA) para testar os efeitos imediatos das emoções positivas e negativas sobre os níveis de S-IgA. O efeito de cada estímulos emocionais sobre a S-IgA foi então analisada através de um one-way ANOVA. Os resultados foram analisados a longo prazo para a significância global pelo teste de Friedman para medidas repetidas análise de variância por posto e usando o sinal de Wilcoxon-classificado para o significado em intervalos horários.



Resultados
dados psicológicos: estudo preliminar
Os resultados dos questionários de auto-relato e de medidas de freqüência cardíaca dos participantes de assistir ao vídeo guerra respostas indicaram não uniforme com uma grande variedade de emoções expressas. As fêmeas, por exemplo, teve compaixão ao invés de raiva durante algumas cenas envolvendo crianças. Alguns indivíduos (40%) não sentir raiva e, entre aqueles que fizeram, os sentimentos foram de curta duração. Os sintomas físicos relatados por todos os indivíduos foram descritos como luz para média tensão ou irritação no estômago. Grupo freqüência cardíaca média não aumentou significativamente. A pontuação média para o humor do grupo foi de 315 ± 302. Em contraste, os resultados da auto-indução de um grupo &F; mostrou mais consistência. Todos os indivíduos com sentimentos de ira, sem emoções conflitantes positivos relatados, no entanto, alguns indivíduos também relataram sentimentos de frustração e ressentimento. A pontuação média de humor para esse grupo de 616 ± 199 não foi significativamente diferente (t p = 2,13, p> 0.05) no grupo de vídeo. Os sintomas físicos eram tipicamente descrita como um nó no estômago e um indivíduo lágrimas desenvolvidos. Os resultados indicam que a evocação das emoções negativas produz uma experiência emocional mais intensa do que assistir a vídeos e, portanto, utilizados no estudo subseqüente de longo prazo.

Os resultados dos dois grupos em C &C; foram semelhantes. Cuidados e / ou compaixão foi vivida por 90% dos indivíduos dos dois grupos. A maioria dos indivíduos não conseguia distinguir os sentimentos de cuidado daqueles de compaixão. A média da pontuação total do humor também foram semelhantes nos dois grupos: 543 ± 180 para o grupo de vídeo e 510 ± 251 para o grupo de auto-indução. Ausência de sintomas físicos desagradáveis foram relatados por ambos os grupos. A fim de manter a coerência com a auto-indução de raiva, o método de auto-indução também foi utilizado no estudo de longo prazo para induzir a estados emocionais positivos.



S-IgA dados: estudo preliminar
Os resultados na Figura 1 indicam que ambos os sentimentos de &C; C e A &F; causou um aumento de S-IgA imediatamente após a experiência emocional em comparação com o grupo controle. Os dados são normalizados para facilitar a comparação entre os grupos. Os efeitos, entretanto, foram dependentes do método utilizado para gerar os diferentes estados emocionais. O grupo ira auto-induzidos tiveram um aumento significativo nos níveis de IgA-S (z = -2,02, p = 0,05) enquanto que o grupo de vídeo guerra não (z =- 0,37, p> 0,05). No caso da C & C, ambos os métodos resultaram num aumento dos níveis de S-IgA, embora apenas o grupo auto-induzidos produziu efeitos significativos (z = -1,83, p = 0,05). Na auto-induzidos C &C; grupo 80% dos indivíduos apresentaram níveis aumentados de S-IgA, enquanto apenas 60% do grupo A mostraram aumentos &F;. Análise do grupo controle não apresentaram diferenças significativas nos níveis de IgA-S (t = 0,89, p> 0,05) antes e após o período de relaxamento.



Efeito de estados emocionais na concentração de IgA-S
Com base nos resultados do estudo preliminar, foram comparados os efeitos dos sentimentos de auto-induzida de C e A &C; &F; utilizando uma maior (n = 10) da população com os efeitos de um grupo de controle de música. Os indivíduos foram convidados a experimentar estados emocionais por um período de 5 minutos desde que os resultados do estudo preliminar indicou a maioria dos sujeitos tinha dificuldade em manter estes estados por períodos mais longos. Os resultados na Figura 2 (amostras de saliva para 0,25 ml) indicam um aumento na concentração de S-IgA imediatamente depois de experimentar tanto emoções positivas ou negativas, 18% para o grupo A &F; e 41% para o grupo &C; C, quando comparado com o controle da música grupo que teve um aumento de 12%. análise de variância revelou que o efeito principal, que representa o total antes e após as diferenças entre os grupos, foi significativa, F (1,18) = 10,81 (p0.01). O principal efeito da interação (condição x tempo), no entanto, não atingiu significância estatística, F (1,18) = 0,42 (p> 0,05). Comparando os dois grupos de expressão emocional usando uma ANOVA one-way repetidos testes medidas indicaram um aumento significativo na S-IgA imediatamente após a F & C, C (1,9) = 6,34 (p = 0,05), embora o aumento segue uma &F; não foi significativa , F (1,9) = 4,48 (p> 0,05). Análise das diferenças antes e depois para o grupo de controle de música não indicou alterações significativas nos níveis de IgA-S, t = 0,41 (p> 0,05).

Os efeitos a longo prazo são apresentados na Figura 2. A análise de variância pelo Rank revelou que o efeito global de antes e imediatamente após a experiência emocional de ambos os grupos foi significativa x2 (6) = 22,32 (p <0,01). Usando o sinal de Wilcoxon-classificado para os diferentes grupos, uma diminuição significativa nos níveis de IgA-S foi observado para as primeiras cinco horas depois que os participantes experimentaram A & F, com níveis de retorno aos níveis basais na sexta hora. Em contraste, os níveis de S-IgA seguinte uma hora &C; C não foram significativamente diferentes níveis de base, embora tenha havido uma tendência gradual para níveis mais elevados durante todo o período de seis horas.

Os resultados na Figura 3 comparar os efeitos de C &C; quando diferentes períodos de coleta de saliva foram utilizados. Apesar de um aumento significativo nos níveis de S-IgA foi observada com amostras de 0,25 ml (recolhidos mais de 15 segundos), alterações nos níveis de S-IgA após C &C; não alcançou significância para qualquer um minuto ou quatro períodos de coleta de amostra minutos.

Nós suspeitamos que essas diferenças podem ser explicadas se secreções S-IgA ocorreu predominantemente durante e logo após a experiência emocional e que a coleta contínua de saliva diluída a níveis de S-IgA. Os resultados na Figura 4 mostra a amostras sequenciais de um minuto de apoio a essa conclusão e indicam uma redução contínua na concentração de S-IgA durante o período de tempo de quatro minutos. As amostras coletadas durante o minuto, segundo, terceiro e quarto apresentaram concentrações significativamente menores de S-IgA do que o valor de partida original, com uma diminuição de 17,7% (z = -3,06, p <0,01), 31,6% (z = -3,92, p <0,001) e 39,5 % (z = -3,92, p <0,001), respectivamente. Além disso, esta diminuição da IgA-S foi independente do volume de saliva, que não diminuem continuamente, e, em alguns indivíduos, mesmo subiram durante o período de tempo de 4 minutos (dados não mostrados). Estes resultados indicam que a magnitude do aumento de S-IgA imediatamente após a experiência emocional diminui gradualmente quando mais períodos de coleta são usados.



as alterações psicológicas
Os resultados dos testes POMS (Figura 5) indicam uma mudança acentuada no humor atual psicológica de indivíduos que experimentam estados emocionais. A média DTM escores para o grupo &C; C foi significativamente reduzida em 19 pontos (z = -2,70, p <0,01), e os escores para o grupo A &F; significativamente aumentada em 95 pontos (z = -2,80, p <0,01). Estes resultados são consistentes com a hipótese de que os estados emocionais negativos perturbação do humor aumentar, enquanto que o transtorno de humor positivo estados diminuir. Os fatores individuais POMS, também apresentado na Figura 5, indicam significância em todas as diferenças antes e depois, com exceção da diminuição do fator de desânimo da depressão no grupo C &C;. Assim, o grupo C &C; sofreu reduções dramáticas na ansiedade, tensão, hostilidade, raiva, fadiga e confusão, bem como um aumento do vigor. O grupo A &F;, por outro lado, experimentou exatamente o oposto. Estes resultados são depois validados pelos resultados obtidos através dos questionários de auto-relato. A pontuação média de humor de 654 ± 166 para o grupo enfrentando C &C; foi estatisticamente maior (t = 1,83, p <0,05) do que a pontuação de 400 ± 243 para o grupo A &F;. Estes resultados indicam que os sentimentos de C &C; foram sentidas mais intensamente e por mais tempo do que os sentimentos de A & F. Os questionários também indicaram que outras emoções também foram experimentados nos dois grupos. Assim, o grupo C &C; relataram sentimentos de gratidão, amor e tranquilidade e que o grupo A &F; sentiu agravamento, frustração e ressentimento. Além disso, o grupo A &F; relataram uma variedade de sintomas físicos, incluindo dores de cabeça, indigestão, dores musculares e fadiga. O único sintoma físico relatadas pelo grupo &C; C foi o de relaxamento.



taxa de alterações do coração
A freqüência cardíaca aumentou de 65,3 ± 8,7-69,3 ± 8,4, enquanto experimenta A & F. Utilizando uma ANOVA one-way análise deste efeito foi significativo, F = 30,23 (p <0,01). O ligeiro aumento da freqüência cardíaca de 61,2 ± 5,3-62,8 ± 4,8, enquanto experimenta C & C, no entanto, não alcançou significância, F = 1,65 (p> 0,05).



Discussões
Uma das principais conclusões deste estudo é a demonstração de que um período de cinco minutos de experimentar C &C; imediatamente produziu um aumento significativo nos níveis de S-IgA, enquanto A &F; não. Esses estados emocionais podem ainda ser distinguidos por medir os efeitos durante várias horas, pois os níveis de IgA-S manteve-se baixa durante cinco horas consecutivas após a A & F, que, após C &C; eles retornaram aos níveis basais após uma hora. Os efeitos imediatos foram mais pronunciados quando as emoções eram auto-induzido, em comparação com o método de vídeo externo.

Este aumento dos níveis de S-IgA foram mais visíveis quando as amostras de saliva foram coletadas em períodos mais curtos de tempo, em contraste com a coleta de vezes mais usada em alguns estudos anteriores. Em geral, as amostras coletadas com maior tempo de coleta apresentaram concentrações baixas de S-IgA do que os recolhidos ao longo de tempo mais curto e este efeito foi independente do volume de saliva. Estudos anteriores demonstram os efeitos do estresse sobre os níveis de S-IgA observados resultados semelhantes ou não os volumes de saliva foram tomadas em consideração [11, 26]. Com base nos resultados do presente estudo, acreditamos que as medidas tendo em conta o volume de saliva está adicionando uma variável de confusão, quando o principal evento fisiológico de interesse é a quantidade real de S-IgA secretada pelas glândulas salivares durante ou imediatamente após uma experiência emocional . A segunda coleção de 15 vezes utilizada neste estudo permitiu a mensuração desse evento. A diminuição do fluxo salivar durante o estresse e estados emocionais negativos [34] não era a principal área de interesse neste estudo. Alguns estudos anteriores pode ter perdido a resposta IgA-S para as emoções, diluindo os efeitos com maior tempo de coleta de saliva.

Embora o aumento dos níveis de S-IgA aqui relatado imediatamente após a sentimentos de raiva, não atingiu significância, um aumento significativo na freqüência cardíaca e distúrbios do humor, juntamente com uma variedade de sintomas físicos, incluindo dores de cabeça boca seca e dores musculares. Estes sintomas geralmente durou três horas após a experiência inicial de raiva e, em alguns casos persistiu por seis horas. É interessante notar que o período de tempo de sintomas desconfortáveis estreito paralelo com a diminuição dos níveis de S-IgA. Isto confirma estudos anteriores que relatam eventos cardiovasculares [35] e do humor [36] distúrbios, em associação com raiva e ansiedade.

Também é provável que as mudanças observadas aqui foram especificamente devido à intervenção emocional, embora as possíveis interações entre a intervenção e outros fatores psicossociais como estilo de vida e tempos de ciclo menstrual não pode ser descartada. Estes factores são susceptíveis de contribuir para mudanças de base entre os grupos, mas não são susceptíveis de afectar as alterações S-IgA imediatamente após experiências emocionais. As diferenças individuais associados a variações diurnas foram minimizados neste estudo, testando todos os indivíduos ao mesmo tempo do dia. Estudos anteriores que mediram as concentrações de S-IgA durante períodos de estresse têm comparado S-IgA valores em dias diferentes, sem levar em conta variações circadianas [11, 14, 23].

Os efeitos de uma &F; em S-IgA aqui relatadas são semelhantes aos obtidos por McClelland et al. [23], que observaram aumentos significativos em cerca de S-IgA e norepinefrina após universitários completaram uma prova estressante. O estudo de McClelland suporta outros, demonstrando a ativação simpática em associação com o estresse [37] por meio de análise de potência espectral da variabilidade da freqüência cardíaca para avaliar a regulação simpática da freqüência cardíaca. A observação de aumento da freqüência cardíaca durante a raiva apoia a nossa observação anterior de aumento da atividade simpática, como medido por meio de análise espectral de potência, durante a raiva [38]. Estes resultados em conjunto com os questionários de auto-relato indicam que os indivíduos verdadeiramente experiente raiva. Nosso estudo anterior [38] também demonstraram que a emoção positiva de apreciação, gerado pela técnica de auto-indução utilizado no presente estudo, o aumento da atividade parassimpática. O aumento da atividade autonômica associada a estados emocionais fornece um mecanismo para explicar as mudanças imediatas nos níveis de S-IgA, uma vez que a glândula salivar é inervado por ambos os neurotransmissores nervoso simpático e parassimpático e sistemas adrenérgicos regular exocitose desta glândula [39].

A maioria dos estudos examinaram mudanças imediatas na S-IgA na experiência emocional. No entanto McClelland, et al. [23] relatou que, após um aumento imediato nos níveis de S-IgA, que depois diminuíram significativamente uma hora e três quartos após um episódio estressante. Bifásico respostas imunes também têm sido observadas após o ip injeção de adrenalina [40]. Uma resposta similar bifásico para uma &F; foi observado no presente estudo, alargando assim as observações originais McClelland [23]. A diminuição dos níveis de IgA-S manteve-se significativamente inferior aos níveis basais durante cinco horas após a primeira experiência emocional de raiva. Estes resultados são ainda mais significativos quando considerados no contexto de dados de controle do ritmo circadiano estudos anteriores [41, 42], demonstrando aumento significativo nas concentrações de S-IgA do meio-dia às seis horas, o tempo usado no estudo [38, 43 ].

Estes achados podem explicar os resultados inconsistentes anterior dos níveis de IgA seguintes estímulos emocionais desde os tempos pós estímulos são tão variados. Estes resultados também oferecem uma visão de um possível mecanismo para explicar a neuroendocrinológicos imunossupressão a longo prazo associados com estresse emocional. Aldosterona [44] e neuropeptídeos [39, 45], conhecido por ser elevada em estresse, tem ações diretas sobre as glândulas salivares. Estes resultados têm implicações importantes quanto à freqüência de emoções estressantes muitas pessoas experimentam e aparente a longo prazo efeitos imunossupressores dessas emoções.

É interessante notar que ambos os estados emocionais positivos e negativos causados ao aumento imediato do S-IgA, embora o aumento de raiva não foi significativa. Resultados semelhantes foram obtidos por outros pesquisadores, que compararam diretamente emoções positivas e negativas, por exemplo, Knapp [15] observaram reduções semelhantes na proliferação de linfócitos e Futterman [21] observaram variabilidade semelhante em uma variedade de parâmetros imunológicos. Por outro lado, alguns pesquisadores obtiveram oposto efeitos imunológicos com emoções positivas e negativas [17, 20]. Os resultados deste estudo indicam que a quantidade de tempo decorrido entre a experiência emocional ea medida imunológico é fundamental e pode explicar os resultados variáveis na literatura. O aumento dos níveis de S-IgA aqui relatado, em resposta às emoções positivas podem ser em parte devido ao relaxamento, uma vez que como os outros [46] observaram uma tendência de aumento da S-IgA após um período neutro, descansando. Não obstante os efeitos observados aqui, usando técnicas de auto-indução para induzir a estados emocionais positivos são significativamente maiores do que aquelas devido a um estado de relaxamento generalizado.

A técnica de indução de auto-utilizados neste estudo produziram aumentos relativamente grandes em S-IgA que foram tão elevadas como 240% em alguns indivíduos. Estes efeitos relativamente grande immunoenhancing pode ser explicado pela técnica de Freeze-Frame usados que incide sobre o coração sentiu sentimentos associados com verdadeiro, as emoções em tempo real. Este método é, portanto, distintas de outras técnicas, tais como atores interpretando os estados emocionais ou técnicas lembrar que incidem sobre as componentes mental / imagética da experiência emocional.

Os resultados deste estudo indicam que a auto-indução de um estado emocional positivo é mais eficaz em estimular o S-IgA do que os métodos externos. Em um estudo anterior, observamos que os sentimentos de valorização gerada pela auto-indução Freeze Frame aumento da atividade parassimpática técnica de medida por meio de análise de potência espectral da variabilidade da freqüência cardíaca [38]. Desde a secreção salivar é primariamente ativados por nervos parassimpáticos, regulação autonômica oferece um mecanismo possível para explicar o aumento imediato da S-IgA seguintes emoções positivas. Além do cuidado com sentimento e compaixão, o Freeze Frame técnica também induziram um estado geral de bem-estar, sensações de relaxamento e aumento da energia, que durou muitas vezes ao longo do dia. A aplicação clínica de tais estados emocionais positivos tem sido demonstrada com indivíduos HIV +, que apresentou melhora dramática em uma variedade de testes psicológicos na sequência de um programa de intervenção de seis meses, incorporando a técnica Freeze Frame [43].



Conclusão
IgA salivar, freqüência cardíaca e de humor foram mensurados em trinta indivíduos antes e depois de experimentar os estados emocionais de carinho e compaixão (C & C) e raiva e frustração (A & F). Estados emocionais foram despertadas tanto por uma técnica de manejo do estresse, especialmente desenvolvido (interno) ou mostrando os participantes fitas de vídeo (externas).

Aumentos no IgA-S após uma &F; só foram vistos usando a técnica de auto-recordação. Um aumento significativo da perturbação do humor total foi observada, bem como um aumento da freqüência cardíaca. Um aumento imediato de S-IgA após um período de cinco minutos de raiva foi seguido por uma grande diminuição que se manteve por mais de cinco horas. Auto-induzidos sentimentos de cuidados produziu aumentos significativamente maiores em S-IgA do que as técnicas de indução externa enquanto que uma diminuição concomitante na perturbação do humor total foi observada em ambos os métodos. Em contraste com a raiva, o aumento imediato de S-IgA cuidados a seguir não foi seguido por uma diminuição dos níveis de S-IgA. Em vez disso uma tendência para aumento dos níveis foi observado ao longo dos próximos seis horas.

Uma relação não-linear entre as taxas de fluxo salivar e concentração de S-IgA foi observada usando amostras sequenciais um minuto. Além disso, antes e após as diferenças dos efeitos dos estados emocionais sobre as concentrações de S-IgA indicam que períodos mais curtos de coleta são mais informativas. Os resultados confirmam e expandem estudos anteriores, que também investigaram os efeitos immunoenhancing de estados emocionais positivos. Esses resultados indicam a necessidade de uma gestão eficaz de, a longo prazo efeitos imunossupressores das emoções negativas.
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The Physiological and Psychological Effects of Compassion and Anger
Glen Rein, Mike Atkinson, and Rollin McCraty

Journal of Advancement in Medicine. 1995; 8(2): 87-105. Reprinted by permission.

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Summary
References
Abstract
Salivary IgA, heart rate and mood were measured in thirty individuals before and after experiencing care or anger. Two methods of inducing the emotional states were compared: self-induction and external induction via video tapes. Anger produced a significant increase in total mood disturbance and heart rate, but not in S-IgA levels. Positive emotions, on the other hand, produced a significant increase in S-IgA levels. Examining the effects over a six hour period we observed that anger, in contrast to care, produced a significant inhibition of S-IgA from one to five hours after the emotional experience. Results indicate that self-induction of positive emotional states is more effective at stimulating S-IgA levels than previously used external methods. Self-induction techniques may therefore be useful in minimizing the immunosuppressive effects of negative emotions.



Introduction
Salivary immunoglobulin A (S-IgA) is the predominant antibody class in mucosal secretions [1], provides the first line of defense against pathogens in the upper respiratory tract, the gastrointestinal system and the urinary tract [2], and is frequently used as a measure of secretory immunity. Higher levels of S-IgA are associated with decreased incidence of disease and susceptibility to upper respiratory infections [3, 4].

Although it is well known that psychosocial factors, including major stressful life events, produce detrimental effects on a variety of immune functions [5], most studies do not distinguish specific affective states from a generalized stress response. Minor stressors associated with negative daily life events affect mood [6, 7] and, somewhat surprisingly, minor mood fluctuations are more strongly correlated with disease than major stressors [8]. Emotions and moods have been studied with respect to their effects on the immune system [5] and on the frequency, severity and susceptibility to diseases [9, 10].

Reduced levels of S-IgA are seen following a variety of psychosocial factors including stressful life situations, withdrawal of social support [11] and negative emotional states like bereavement [12], anxiety [13] and the need to have power and to influence others [3, 14]. Immunosuppresive effects of negative emotions have also been reported in terms of decreased lymphocyte proliferation [15] and an inhibition of natural killer cell activity [16].

In contrast, relatively few have investigated the effects of positive emotions on the immune system. Stone [17] studied normal affective states by measuring daily fluctuations in mood and observed a correlation between the days when individuals experienced positive moods and elevated S-IgA levels. Previous studies on the positive emotions of happiness and joy have reported conflicting results with some investigators observing immunoenhancement [18-20] while others observed immunodepression [15] or no change in immunity [15, 21].

Another approach to studying positive emotional states is the use of individuals with loving and caring psychological characteristics. These qualities, referred to as affiliative motivation, are defined as a desire to establish and maintain warm relationships with others. Individuals receiving adequate social support show greater affiliative tendencies [22], have less life stress [22], show smaller increases in stress hormones following stress [23] and are less likely to get ill [3, 24]. Such individuals also tend to show increased natural killer cell activity [16] and increased S-IgA, even when stressed [11, 25]. McClelland and Kirshnit [26] reported that affiliative qualities could be induced in subjects by having them watch a video of Mother Teresa’s work with the dying in India after which an immediate increase in S-IgA levels was observed.

The purpose of this study was to verify the immediate effects of positive and negative emotions on S-IgA and to examine effects over a 6 hour period. We were also interested in comparing the more traditional method of externally inducing emotions, by having the subjects watch selected videos, with a newly developed stress-management technique which trains subjects to self-induce and experience genuine, heart-felt emotions in themselves. We also studied the short-term time course of S-IgA levels after an emotional experience to test the hypothesis that maximal changes in S-IgA occur during or immediately after experiencing emotions.



Methods
Subjects
A total of thirty subjects, 13 male and 17 female, were randomly assigned to the various subgroups used in this study. All subjects were in good health and were free from respiratory symptoms, colds and headaches. The age of the subjects varied between 17 and 50 (mean=38). All individuals maintained the same work schedule, sleep cycle, social environment and diet. None of the subjects were currently taking prescription drugs and for at least 8 hours prior to each testing period, subjects refrained from smoking, exercising, eating or drinking anything except water. All subjects were trained in a stress management technique called Freeze-Frame which has previously been described in detail elsewhere [27].



Experimental Design
All experiments were started at 10 a.m. to minimize diurnal variations. A preliminary study was designed to test for the different effects of self-induced (Freeze-Frame) and externally-induced (video tapes) emotions on S-IgA. Twenty of the subjects were randomly divided into four groups with five individuals in each group. Two of the groups were asked to experience care and/or compassion (C&C), and the other two anger and/or frustration (A&F). The two groups were tested on two separate occasions with two days between each experiment. Self-induced and external induction methods were used for both the C&C; and the A&F; groups. The self-induced method was more effective in inducing the emotional states and stimulating S-IgA levels and was therefore used in the main study designed to determine the long term effects of A&F; and C&C; on S-IgA levels. In the main study subjects were age and sex-matched and were randomly assigned to three groups of ten individuals each. One group experienced A&F, the second group C&C; and the third group acted as a control. All individuals from each group were tested on a single day and all three groups were tested within a seven day period.

In the preliminary study unstimulated whole saliva samples were collected in a graduated cylinder for a 4 minute collection period according to the procedure of Kerr [28]. Saliva samples were collected on arrival at the lab and after a 15 minute rest period. The difference between these two samples was used as a relaxation effect control. Subjects were given instructions to sit quietly and not to intentionally alter their emotional state during the rest period. Subjects were then asked to fully experience a specific emotional state for a 15 minute period. At the end of this period an additional 4 minute saliva sample was collected and the subjects completed a self-report questionnaire designed to assess the level of emotional arousal. Saliva samples were frozen within one hour of collection and stored in liquid nitrogen.

For the main study, subjects were asked to experience the emotional state for a 5 minute period. On arrival each subject was wired for ECG monitoring. Unstimulated whole saliva samples were collected immediately before and after the emotional stimuli. In addition, samples were collected with different saliva flow collection times in order to determine if longer collection times masked the S-IgA response during emotional expression. A 0.25 ml sample (corresponding to 15 seconds), a one-minute sample and a three minute sample were collected for baseline values. Immediately after the emotional experience, an additional 0.25 ml sample and four sequential one-minute samples were also collected. The first one-minute sample of this sequence was compared with the one-minute baseline sample. The four sequential one-minute samples where then averaged and compared with the averaged value obtained by adding all of the one-minute baseline samples.

In addition to these samples, 0.25 ml samples were collected at hourly intervals over a 6 hour period starting one hour after the emotional experience. A fixed volume of 0.25 ml was chosen as the average volume collected in a 15 second time period because it was more convenient to have subjects fill the saliva to a marked level in a test tube.

Subjects in the control condition were not given instructions relating to their emotional state. Unstimulated saliva samples of 0.25 ml were collected before and after listening to a balanced selection of emotionally neutral music for 5 minutes.



Inducing Emotional States
C&C; and A&F; were chosen as representative positive and negative emotional states. For both cases, participants were asked to experience the emotions at as deep a feeling level as possible. Feelings of care and compassion were induced by two different methods: intentionally self-inducing the feelings and externally stimulating them with video tapes. In order to facilitate the self-induction method a technique called Freeze-Frame was used. This technique allows participants to consciously disengage from mental and emotional reactions to external or internal events by shifting their attention to the physical area around the heart, where most people subjectively feel positive emotions, and focusing on feelings of care or compassion toward someone or something [27, 29, 30]. In the external method of inducing positive emotions, participants were asked to freely experience all emotions felt when watching a video tape of Mother Teresa, a Roman Catholic nun caring for the diseased and dying in the slums of Calcutta.

Negative emotional states were induced by self-recall and video stimulation methods. Self-induced emotions were accomplished by asking subjects to recall situations in their own lives which arouse feelings of anger and/or frustration. Subjects were asked to recapture and maintain the feelings as best they could. In the second method participants were instructed to experience all emotions aroused while watching a specially edited video of war scenes similar to the one used by McClelland [26].



Psychological Testing
In the preliminary study, a self-report questionnaire was used for mood assessment which consisted of seven questions designed to determine the intensity and duration of the emotional states. Intensity was quantified on a 10-point scale from 1="very weak" to 10="very strong," and duration was quantified as a percentage of the total experimental period the emotion was felt. Mean mood scores were calculated by multiplying the intensity of the feelings by the duration of the emotion. Higher mean mood scores reflect a deeper emotional experience. A second questionnaire asked for a qualitative description of other emotions experienced and for the presence of physical symptoms. Both questionnaires were given immediately after the experimental period. The qualitative questionnaire was also completed in the long term study at hourly intervals throughout the day.

In addition to these questionnaires, mood changes were assessed in the long term studies using the Profile of Mood State (POMS) test (EdiTS/Educational and Industrial Testing Service, San Diego, CA) which is designed to measure transient affective states. POMS tests were taken immediately before and after experiencing the emotional states. All subjects rated the extent to which a variety of adjectives (65 in all) described their present mood state. Each adjective was rated on a 5-point intensity scale from "not at all" to "extremely." The total mood disturbance (TMD) score was calculated as the sum of the scores for each of the six primary moods. According to the POMS manual, all moods, except vigor, were assigned a negative score. Higher scores indicate greater mood disturbance.



Heart-Rate Determination
Ag/AgCl disposable electrodes were used for all bipolar ECG measurements. The positive electrode was located on the left side at the 6th rib and the reference was placed near the top of the chest just under the neckline. Grass model 7P4 amplifiers were used for ECG amplification. All data were processed by a 16 channel, 16 bit digitizer in conjunction with the software of the Bio Pac system [31]. ECG measurements were recorded for a 15 minute baseline establishment period, during the test period and for 15 minutes after the emotional experience in all experiments.



S-IgA Determinations
Saliva samples were assayed for IgA concentration by the single radial immunodiffusion method of Mancini et al. [32] and made commercially available by Binding Site Inc. Although there is some debate about the accuracy of the various methods available to measure S-IgA, we chose the radial immunodiffusion method to allow direct comparison with previous studies examining the effects of emotional states. Aliquots of saliva (5ul) were diluted 1:2 (v/v) in phosphate buffered saline and placed in the cylindrical wells of agarose gel plates impregnated with monospecific sheep anti-human S-IgA (Binding Site, San Diego, CA). Each plate also contained a reference standard of 100 mg/L purified human serum S-IgA (Binding Site, San Diego, CA). After a 72 hour incubation at 20° C, the precipitation reaction was complete and the diameter of the ring was measured using an 8X ocular micrometer to an accuracy of 0.1 mm. All measurements from the plates were the average of two separate readings by two readers which varied between 0 and 10%. S-IgA concentration values were read from a standard curve obtained using purified human serum S-IgA. Variations between agar plates were determined by normalizing all values to the reference standard. All S-IgA values were multiplied by 3.25 according to Brandtzaeg [33] to correct for the sedimentation coefficient value of S-IgA. S-IgA concentration is expressed as mg/dL.



Statistical Analysis
Raw data from the preliminary study were analyzed for statistical significance using the Wilcoxon sign-ranked repeated measures test. A one-tailed analysis was used for comparing positive emotions since previous studies predicted only increases in S-IgA. Two-tailed analyses were used with all other statistical analysis. Raw data from the main study were analyzed for overall significance using a 2 x 2 repeated measures analysis of variance (ANOVA) to test the immediate effects of positive and negative emotions on S-IgA levels. The effect of each emotional stimuli on S-IgA was then analyzed using a one-way ANOVA test. The long term results were analyzed for overall significance using the Friedman repeated measures analysis of variance by rank and using the Wilcoxon sign-ranked test for significance at hourly intervals.



Results
Psychological data: preliminary study
Results from the self-report questionnaires and from heart rate measures of participants watching the war video indicated non-uniform responses with a wide variety of emotions being expressed. Females, for example, experienced compassion rather than anger during certain scenes involving children. Some individuals (40%) did not feel angry and, amongst those who did, the feelings were short-lived. The physical symptoms reported by all individuals were described as light to medium tension or irritation in the stomach. Group mean heart rate did not significantly increase. The mean mood score for the group was 315 ± 302. In contrast, results from the self-induction of A&F; group showed more consistency. All individuals experienced anger with no conflicting positive emotions reported, however, some individuals also reported feelings of frustration or resentment. The mean mood score for this group of 616 ± 199 was not significantly different (t=2.13, p>0.05) from the video group. The physical symptoms were typically described as a knot in the stomach and one individual developed tears. The results indicate that recall of negative emotions produces a more intense emotional experience than watching videos and was therefore used in the subsequent long-term study.

Results from the two groups experiencing C&C; were similar. Care and/or compassion was experienced by 90% of individuals in both groups. Most individuals could not distinguish feelings of care from those of compassion. The mean total mood scores were also similar in both groups: 543 ± 180 for the video group and 510 ± 251 for the self-induction group. No unpleasant physical symptoms were reported by either group. In order to maintain consistency with the self-induction of anger, the self-induction method was also used in the long-term study to induce positive emotional states.



S-IgA data: preliminary study
The results in Figure 1 indicate that both feelings of C&C; and A&F; caused an increase in S-IgA immediately after the emotional experience as compared with the control group. The data is normalized to facilitate comparison between groups. The effects, however, were dependent on the method used to generate the different emotional states. The self-induced anger group had a significant increase in S-IgA levels (z= -2.02, p0.05) whereas the war video group did not (z=-0.37, p>0.05). In the case of C&C, both methods resulted in increased S-IgA levels, although only the self-induced group produced significant effects (z= -1.83, p0.05). In the self-induced C&C; group 80% of the individuals showed increased levels of S-IgA while only 60% of the A&F; group showed increases. Analysis of the control group showed no significant differences in S-IgA levels (t=0.89, p>0.05) before and after the relaxation period.



Effect of Emotional States on S-IgA Concentration
Based on the results from the preliminary study, we compared the effects of self-induced feelings of C&C; and A&F; using a larger (n=10) population with the effects of a music control group. Subjects were asked to experience emotional states for a 5 minute period since results from the preliminary study indicated most subjects had difficulty in maintaining these states for longer periods. The results in Figure 2 (for 0.25 ml saliva samples) indicate an increase in S-IgA concentration immediately after experiencing either positive or negative emotions, 18% for the A&F; group and 41% for the C&C; group as compared with the music control group which had a 12% increase. ANOVA analysis revealed that the main time effect, representing the overall before and after differences for both groups, was significant, F(1,18) = 10.81 (p0.01). The main interaction effect (condition x time), however, did not reach statistical significance, F(1,18) = 0.42 (p>0.05). Comparing the two emotional expression groups using a one-way ANOVA repeated measures test indicated a significant increase in S-IgA immediately after C&C, F(1,9) = 6.34 (p0.05), although the increase following A&F; was not significant, F(1,9) = 4.48 (p>0.05). Analysis of before and after differences for the music control group indicated no significant changes in S-IgA levels, t=0.41 (p>0.05).

The long-term effects are presented in Figure 2. Analysis of variance by rank revealed that the overall effect of before and immediately after the emotional experience for both groups was significant x2 (6) = 22.32 (p 0.01). Using the Wilcoxon sign-ranked test for the different groups, a significant decrease in S-IgA levels was observed for the first five hours after the participants experienced A&F, with levels returning to baseline at the sixth hour. In contrast, S-IgA levels one hour following C&C; were not significantly different than baseline levels, although there was a gradual tendency toward increased levels throughout the six hour period.

The results in Figure 3 compare the effects of C&C; when different saliva collection periods were used. Although a significant increase in S-IgA levels was observed with the 0.25 ml samples (collected over 15 seconds), changes in S-IgA levels after C&C; did not reach significance for either one minute or four minute sample collection times.

We suspected that these differences might be explained if S-IgA secretions predominantly occurred during and shortly after the emotional experience and that continued collection of saliva diluted the S-IgA levels. The results in Figure 4 showing the sequential one-minute samples support this conclusion and indicate a continual decrease in S-IgA concentration over the four minute time period. Samples collected during the second, third and fourth minutes showed significantly lower S-IgA concentrations than the original starting value, decreasing by 17.7% (z = -3.06, p 0.01), 31.6% (z = -3.92, p 0.001) and 39.5% (z = -3.92, p 0.001) respectively. Furthermore, this decrease in S-IgA was independent of the volume of saliva which did not continually decrease and in some individuals even rose during the 4 minute time period (data not shown). These results indicate that the magnitude of the increase in S-IgA immediately following the emotional experience gradually decreases when longer collection periods are used.



Psychological changes
The results of the POMS tests (Figure 5) indicate a marked shift in the current psychological mood of individuals experiencing emotional states. The mean TMD scores for the C&C; group decreased significantly by 19 points (z = -2.70, p 0.01), and the scores for the A&F; group significantly increased by 95 points (z = -2.80, p 0.01). These results are consistent with the hypothesis that negative emotional states increase mood disturbance, whereas positive states decrease mood disturbance. The individual POMS factors, also presented in Figure 5, indicate significance in all before and after differences, except for the decrease in the depression-dejection factor in the C&C; group. Thus, the C&C; group experienced dramatic decreases in tension-anxiety, anger-hostility, fatigue and confusion as well as an increase in vigor. The A&F; group, on the other hand, experienced the exact opposite. These findings are further validated by results obtained from the self-report questionnaires. The mean mood score of 654 ± 166 for the group experiencing C&C; was statistically higher (t=1.83, p < 0.05) than the score of 400 ± 243 for the A&F; group. These results indicate that the feelings of C&C; were experienced more intensely and for longer duration than the feelings of A&F. The questionnaires also indicated that other emotions were also experienced in the two groups. Thus, the C&C; group reported feelings of love, appreciation and tranquillity; whereas the A&F; group felt frustration, aggravation and resentment. Furthermore, the A&F; group reported a variety of physical symptoms including headaches, indigestion, muscle pains and fatigue. The only physical symptom reported by the C&C; group was that of relaxation.



Heart rate changes
Heart rate increased from 65.3 ± 8.7 to 69.3 ± 8.4 while experiencing A&F. Using a one-way ANOVA analysis this effect was significant, F = 30.23 (p 0.01). The slight increase in heart rate from 61.2 ± 5.3 to 62.8 ± 4.8 while experiencing C&C, however, did not reach significance, F = 1.65 (p > 0.05).



Discussion
One of the main findings from this study is the demonstration that a 5 minute period of experiencing C&C; immediately produced a significant increase in S-IgA levels, while A&F; did not. These emotional states can be further distinguished by measuring effects over several hours, since S-IgA levels remained low for five consecutive hours after A&F, whereas after C&C; they returned to baseline after one hour. Immediate effects were more pronounced when emotions were self-induced as compared to the external video method.

These increased S-IgA levels were more visible when saliva samples were collected over shorter time periods, in contrast to the longer collection times used in some previous studies. In general, samples collected with longer collection times had lower S-IgA concentrations than those collected over shorter times and this effect was independent of the saliva volume. Previous studies demonstrating the effects of stress on S-IgA levels observed similar results whether or not saliva volumes were taken into account [11, 26]. Based on the results of the present study we believe that measurements taking into account saliva volume are adding a confounding variable, when the main physiological event of interest is the actual amount of S-IgA secreted by the salivary glands during or immediately after an emotional experience. The 15 second collection times used in this study allowed measurement of this event. The decrease in saliva flow during stress and negative emotional states [34] was not the main area of interest in this study. Some previous studies may have missed the S-IgA response to emotions by diluting the effects with longer saliva collection times.

Although the increased S-IgA levels reported here immediately following feelings of anger did not reach significance, a significant increase in heart rate and mood disturbances along with a variety of physical symptoms including headache, dry mouth and muscle pains was observed. These symptoms typically lasted for 3 hours after the initial experience of anger and in some cases persisted for 6 hours. It is interesting to note that the time period of uncomfortable symptoms closely parallels the decrease in S-IgA levels. This confirms previous studies which report cardiovascular [35] and mood [36] disturbances in association with anger and anxiety.

It is also likely that the changes observed here were specifically due to the emotional intervention, although possible interactions between the intervention and other psychosocial factors like life style and menstrual cycle times cannot be ruled out. These factors are likely to contribute to baseline shifts between groups, but are unlikely to affect S-IgA changes immediately following emotional experiences. Individual differences associated with diurnal variations were minimized in this study by testing all individuals at the same time of day. Previous studies which have measured S-IgA concentrations during stressful periods have compared S-IgA values on different days without taking into account circadian variations [11, 14, 23].

The effects of A&F; on S-IgA reported here are similar to those obtained by McClelland et al. [23] who observed nearly significant increases in S-IgA and norepinephrine after college students completed a stressful exam. The McClelland study supports others demonstrating sympathetic activation in association with stressors [37] using power spectral analysis of heart rate variability to assess sympathetic regulation of heart rate. The observation of increased heart rate during anger supports our previous observation of increased sympathetic activity, as measured using power spectral analysis, during anger [38]. These results in conjunction with the self-report questionnaires indicate that subjects genuinely experienced anger. Our previous study [38] also demonstrated that the positive emotion of appreciation, generated by the self-induction technique used in the present study, increased parasympathetic activity. Increased autonomic activity associated with emotional states provides a mechanism to explain immediate changes in S-IgA levels, since the salivary gland is innervated by both the sympathetic and parasympathetic nervous systems and adrenergic neurotransmitters regulate exocytosis from this gland [39].

Most studies have examined immediate changes in S-IgA following emotional experiences. However, McClelland et al. [23] reported that after an immediate rise in S-IgA levels, they then significantly decreased one and three-quarter hours after a stressful episode. Biphasic immune responses have also been observed following i.p. injection of adrenaline [40]. A similar biphasic response to A&F; was observed in the present study thereby extending McClelland’s original observations [23]. The decreased levels of S-IgA remained significantly lower than baseline levels for five hours after the initial emotional experience of anger. These findings are even more significant when considered in the context of control data from previous circadian rhythm studies [41, 42] demonstrating marked increases in S-IgA concentrations from noon to 6 PM, the time course used in the present study [38, 43].

These findings may explain previous inconsistent results of IgA levels following emotional stimuli since post stimuli times are so varied. These findings also offer an insight into a possible neuroendocrinological mechanism to explain the long-term immunosuppression associated with emotional stressors. Aldosterone [44] and neuropeptides [39, 45], known to be elevated in stress, have direct actions on salivary glands. These results have important implications considering the frequency of stressful emotions many people experience and the apparent long-term immunosuppressive effects of these emotions.

It is interesting to note that both positive and negative emotional states caused an immediate increase in S-IgA, although the increase with anger was not significant. Similar results have been obtained by other investigators who have directly compared positive and negative emotions, e.g., Knapp [15] observed similar decreases in lymphocyte proliferation and Futterman [21] observed similar variability in a variety of immunological parameters. On the other hand, some investigators have obtained opposite immunological effects with positive and negative emotions [17, 20]. The results of this study indicate that the amount of time elapsed between the emotional experience and the immunological measure is critical and may explain the variable results in the literature. The increased S-IgA levels reported here in response to positive emotions may be partly due to relaxation since we as others [46] observed a trend toward increased S-IgA following a neutral, resting period. Nonetheless the effects observed here using self-induction techniques to induce positive emotional states are significantly greater than those due to a generalized relaxation state.

The self-induction technique used in this study produced relatively large increases in S-IgA which were as high as 240% in some individuals. These relatively large immunoenhancing effects may be explained by the Freeze-Frame technique used which focuses on heart-felt feelings associated with genuine, real time emotions. This method is therefore distinct from other techniques such as actors playing out emotional states or recall techniques which focus on the mental/imagery components of emotional experience.

Results from this study indicate that self-induction of a positive emotional state is more effective at stimulating S-IgA than external methods. In a previous study we observed that feelings of appreciation generated by the Freeze Frame self-induction technique increase parasympathetic activity as measured by power spectral analysis of heart rate variability [38]. Since salivary secretion is primarily activated by parasympathetic nerves, autonomic regulation offers a possible mechanism to explain the immediate increases in S-IgA following positive emotions. In addition to feeling care and compassion, the Freeze Frame technique also induced a general state of well being, feelings of relaxation, and increased energy which often lasted throughout the day. The clinical application of such positive emotional states has been demonstrated with HIV+ individuals who showed dramatic improvement in a variety of psychological tests following a six-month intervention program incorporating the Freeze Frame technique [43].



Conclusion
Salivary IgA, heart rate and mood were measured in thirty individuals before and after experiencing the emotional states of care and compassion (C&C) and anger and frustration (A&F). Emotional states were aroused either by a specially developed stress-management technique (internal) or by showing participants video tapes (external).

Increases in S-IgA after A&F; were only seen using the self-recall technique. A significant increase in total mood disturbance was observed, as well as an increase in heart rate. An immediate increase in S-IgA after a 5 minute period of anger was followed by a large decrease which was sustained for an additional five hours. Self-induced feelings of care produced significantly larger increases in S-IgA than external induction techniques while a concomitant decrease in total mood disturbance was observed in both methods. In contrast to anger, the immediate increase in S-IgA following care was not followed by a decrease in S-IgA levels. Instead a tendency toward increased levels was observed over the following six hours.

A non-linear relationship between saliva flow rates and S-IgA concentration was observed using sequential one minute samples. In addition, before and after differences of the effects of emotional states on S-IgA concentrations indicate that shorter collection times are more informative. The results confirm and extend previous studies which have also investigated the immunoenhancing effects of positive emotional states. These results indicate the need for effective management of the long term immunosuppressive effects of negative emotions.